胡凤荣^1,2 , 王斐² , 任翠¹ , 鲍仁蕾² , 王志强²

1 北京林业大学, 北京, 100083;
2 南京林业大学, 南京, 210037
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 20 篇   doi: 10.3969/mpb.011.000139
收稿日期: 2012年09月29日    接受日期: 2012年10月20日    发表日期: 2012年11月16日

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以风信子基因组DNA为ISSR-PCR扩增模板，采用单因素试验方法，对影响PCR扩增体系中Mg²⁺浓度、dNTPs、模板DNA及引物浓度、Taq酶的用量5个因素进行研究，建立了风信子ISSR-PCR扩增最佳反应体系，即：20 μL反应体系中分别加入2 μL 10×Buffer、1.4 μL Mg²⁺ (25 mmol/L)、1.5 μL dNTPs (2.5 mmol/L)、1.5 μL引物(10 pmol/μL)，0.2 μL Taq酶(5U/μL)，1.2 μL模板(30 ng/μL)，ddH₂O补足体积。并以此体系对110条引物进行筛选，最终获得了多态性高，重复性好的引物12条。

风信子；ISSR-PCR；引物筛选